背景：柴胡龙骨牡蛎汤(CLMD)和解清热、镇惊安神，几个世纪以来在中国被广泛用于治疗神经精神疾病，包括癫痫、痴呆、焦虑、失眠和抑郁。

该研究旨在分析CLMD治疗颞叶癫痫(TLE)患者血浆外泌体中的差异表达蛋白(DEPs)，探讨TLE的生物标志物及CLMD治疗TLE的潜在靶点。

方法：采集正常人群和TLE患者在奥卡西平(OXC)及奥卡西平联合CLMD(OXC.CLMD)治疗前血浆外泌体。外泌体通过超离心从血浆中分离，然后通过透射电镜(TEM)、纳米颗粒跟踪分析(NTA)和流式细胞术进行鉴定。

对DEPs进行蛋白质组学分析，然后进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径富集分析。Western blot检测关键基因蛋白表达水平。

建立氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠模型，OXC单药治疗、OXC.CLMD和CLMD单药治疗(低剂量和高剂量)。采用H&E染色、Nissl染色、Western blot检测海马齿状回神经元损伤及脑组织核糖体蛋白L6 (RPL6)表达。

结果：蛋白质组学分析显示，四组患者血浆外泌体中存在多种DEPs；DEPs在癫痫相关功能和通路中富集。筛选出了4种关键蛋白，包括RPL6、核仁蛋白(NCL)、载脂蛋白A1 (APOA1)和乳酸脱氢酶A (LDHA)。

其中，TLE患者血浆外泌体中RPL6、NCL、LDHA蛋白水平下调，APOA1蛋白水平上调。在OXC和OXC.CLMD处理后，RPL6、NCL、LDHA蛋白水平升高，APOA1蛋白水平降低。此外，与OXC治疗后相比，OXC.CLMD处理后RPL6蛋白水平进一步升高。

在TLE大鼠模型中，海马齿状回神经元变性和坏死增加，RPL6表达水平下降。OXC、OXC.CLMD和CLMD治疗后，神经元变性坏死减少，RPL6表达水平升高；CLMD治疗后RPL6表达明显上调。

结论：RPL6、NCL、LDHA和APOA1是TLE患者治疗前后血浆外泌体中的DEPs。RPL6可能是CLMD治疗TLE的潜在生物标志物。

 

文献来源：

Yang P, Huang Y, Zhu Y, Wang Q, Guo Y, Li L. Plasma exosomes proteome profiling discovers protein markers associated with the therapeutic effect of Chaihu-Longgu-Muli decoction on temporal lobe epilepsy [published online ahead of print, 2023 Jul 19]. J Ethnopharmacol. 2023;116928. doi:10.1016/j.jep.2023.116928.