蛋白质错误折叠是所有常见神经退行性疾病中最显著的特征，每种疾病涉及不同但重叠的主要蛋白质。α-突触核蛋白(α Syn)作为共核蛋白病的致病触发器、疾病标志物和治疗靶点已被广泛研究。帕金森病(PD)的主要诊断标准主要依赖于临床症状的集合，然而神经退行性过程被认为在明显的临床症状被观察到多年前就开始了。因此，迫切需要在出现临床特征之前识别高危患者。

最近的研究证明了种子扩增试验(SAAs)在脑组织匀浆(BHs)和CSF样本中检测αSyn疾病相关聚集物的能力。SAAs在区分PD和DLB患者与健康对照组方面显示了显著的准确性。然而，SAAs目前主要是二元检测(阳性或阴性)，只有半定量读数，这使得它们在监测疾病过程中或治疗反应中αSyn聚集水平的纵向变化时并不理想。

卡塔尔基金会哈马德·本·哈利法大学卡塔尔生物医学研究所Nour Majbour等提出了一种新方法来研究疾病相关的 α-突触核蛋白 (αSyn) 聚集体作为 PD 临床阶段的生物标志物。研究结果发表在Neurology。

Nour Majbour等将种子扩增测定 (SAA) 和 ELISA 相结合，以提供反映 PD 患者临床严重程度的定量测试读数。为实现这一目标，我们最初使用 2 套人脑组织匀浆（试验和验证集）探索了测试的潜力，然后用 2 个独立的人类 CSF 队列对其进行了验证；发现（62 名 PD 患者和 34 名对照）和验证（49 名 PD 患者和 48 名对照）队列。

 该研究表明，寡聚体特异性 ELISA 可稳健地量化来自 PD 或路易体痴呆患者的 SAA 终产物，具有高灵敏度和特异性评分 (100%)。

分析还表明，使用寡聚 ELISA 作为测试读数，而不是单独使用 SAA，可以更早地检测到接种活动。更重要的是，多重分析提供了关于患者临床疾病阶段的可靠信息。

在发现队列中，CSF种子 αSyn 寡聚体水平与 PD 临床症状的严重程度（统一帕金森病评定量表 (UPDRS) 运动 ( r = 0.58，p < 0.001) 和 Hoehn 和 Yahr (H&Y ) 得分 ( r = 0.43, p< 0.01)）相关。在 CSF种子αSyn 寡聚体浓度与 UPDRS运动（ r = 0.50，p < 0.01）和 H&Y 评分（r = 0.49，p < 0.01）之间的验证队列中观察到类似的相关性。

BH 样本组SAA和ELISA分析

验证样品组的SAA和ELISA分析

用对照组和帕金森病患者的脑脊液三份RT-QuIC反应

在 20 小时时，ROC分析的灵敏度为91.9% (95% CI 82.4%-96.5%)，特异性为85.3% (95% CI 69.8%-93.5%)。

发现和验证队列的相关性分析

在发现CSF队列中，CSF- αSyn低聚物将PD患者与对照组区分开来的曲线下面积为0.969，而在同一时间点用硫黄素T最大荧光强度产生的敏感性为80.7% (95% CI 69.1% ~ 88.5%)，特异性为76.5% (95% CI 60.0% ~ 87.5%)，曲线下面积为0.860。

该研究表明， SAA 结合 ELISA 检测是一种比单独使用 SAA 更有前途的诊断工具，通过与疾病严重程度的临床测量相关联提供有关疾病阶段的信息。

该研究将SAA与低聚物特异性ELISA相结合的方法是否适用于其他共核病变患者，以及评估针对αSyn聚集的治疗方法，还有待进一步研究。总之，该研究结果进一步支持了αSyn SAA作为PD患者强有力的临床诊断工具的证据。此外，该研究组已经建立并验证了一种新的方法，可以提供PD患者潜在疾病严重程度的临床信息，这可能是一种有前途的工具，支持针对PD中αSyn寡聚体的临床试验。

原文出处

Disease-Associated {alpha}-Synuclein Aggregates as Biomarkers of Parkinson Disease Clinical Stage. Neurology ( IF 11.800 ) Pub Date : 2022-11-22 , DOI: 10.1212/wnl.0000000000201199